近年來,隨著酶底物法檢測總大腸、大腸埃希氏菌、糞(耐熱)大腸菌群的實驗方法逐漸被普及。酶底物檢測方法需要配合程控定量封口機使用,其中在實驗過程中使用到的51孔定量培養(yǎng)過待測大腸菌群水樣后,需要對照相應的MPN表來查看得出實驗結(jié)果。
那么,對于初次使用酶底物法檢測儀器的實驗人員來說,猛的一看MPN表可能會覺得數(shù)字那么多,不知道該如何查看,接下來小編就來教大家怎么查看酶底物法51孔97孔定量盤MPN表。
酶底物法檢測方法采用大腸桿菌產(chǎn)生β-半乳糖苷酶分解色源底物-ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside)使培養(yǎng)液呈黃色。大腸埃希氏菌產(chǎn)生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)分解MUG(4-methyl-umbelliferyl-β-glucuronide)使培養(yǎng)液在波長366 nm紫外光下產(chǎn)生熒光的原理,來定性定量水中總大腸菌群、糞大腸菌群(耐熱大腸菌群)及大腸埃希氏菌。
該方法操作簡便、實驗周期短并且對實驗人員要求也不高,實驗人員在檢測大腸菌群實驗過程中,由于定量盤內(nèi)添加有大腸菌群檢測試劑,將檢測盤從培養(yǎng)箱中取出后,如果孔格不顯色,就說明檢測結(jié)果為陰性;如果孔格顯示黃色,則說明總大腸菌群檢測結(jié)果為陽性;另外,如果孔格顯示黃色并且在紫外分析儀下顯熒光,則說明大腸埃希氏菌群檢測結(jié)果為陽性,我們就需要計算陽性孔格數(shù)。
其實,我們在對照酶底物法檢測大腸菌群MPN表的查看方法非常簡單。在我們計算完定量盤上的陽性孔格數(shù)后,51孔定量盤直接按照孔格數(shù)對照表即可得出實驗結(jié)果;97孔定量盤需要分別計算陽性大、小孔格數(shù),然后在二維表格中查找對照即可得出準確的實驗結(jié)果。
一般其概況下,實驗結(jié)果的單位是以MPN/100ml,即cfu/ml,該數(shù)值就代表了大腸菌群的濃度。51孔定量盤的檢測范圍是0-200MPN,97孔定量盤的檢測范圍是0-2419MPN。下面我們就舉例說明:比如在51孔格定量盤中查有13個孔格數(shù)顯色為黃色,而在紫外分析儀下無熒光色孔格,在查表可得出,該水樣總大腸菌群濃度值為15.0MPN/100ml。97孔定量盤檢測也是同樣的道理即可得出實驗結(jié)果。
51孔定量盤使用MPN表
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97孔定量盤使用MPN表
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97孔定量盤MPN表2
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以上就是關(guān)于如何查看酶底物法檢測大腸菌群實驗結(jié)果的方法,通過以上內(nèi)容我們可以看出,酶底物法相較于傳統(tǒng)的濾膜法、多管發(fā)酵法,無論是從實驗過程還是實驗結(jié)果的判定都比較省時省力,而且誤差較小,小編也在此建議有條件的實驗室可以嘗試采用酶底物法進行水中大腸菌群的測定。